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上海分光光度計(jì)入門(mén)講解

  • 更新時(shí)間2022-10-19
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   上海分光光度計(jì)的基本構(gòu)成是用一個(gè)分光器件(棱鏡、鏡子)把一個(gè)光源的光分成兩路(確保兩個(gè)光的波長(zhǎng)一致)分別照射在相同的透光容器中的樣品(被測(cè))和基準(zhǔn)(標(biāo)準(zhǔn),已知濃度、成分)溶液,然后對(duì)比穿過(guò)后的光線(對(duì)比樣品和基準(zhǔn)的顏色),即可對(duì)樣品和基準(zhǔn)的一致性做出定性判斷(如:是否達(dá)標(biāo))。通過(guò)樣品與多個(gè)基準(zhǔn)的對(duì)比可以對(duì)樣品做出定量分析。
  選擇可見(jiàn)和紫外可見(jiàn)的分光光度計(jì)所關(guān)注的關(guān)鍵的指標(biāo)有三點(diǎn):一是波長(zhǎng)范圍,二是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度,三是雜散光參數(shù)。波長(zhǎng)范圍的選擇是由用戶實(shí)驗(yàn)需要所定,波長(zhǎng)范圍越寬的價(jià)格越貴;波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及雜散光參數(shù)的數(shù)值越低,表示性能越好。
  使用上海分光光度計(jì)的步驟與方法:
 ?。?)預(yù)熱儀器:
  為使測(cè)定穩(wěn)定,將電源開(kāi)關(guān)打開(kāi),使儀器預(yù)熱20min,為了防止光電管疲勞,不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷。
 ?。?)選定波長(zhǎng):
  根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器,使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。
 ?。?)固定靈敏度檔:
  根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況,為使吸光度讀數(shù)為0.2~0.7,選擇合適的靈敏度。為此,旋動(dòng)靈敏度檔,使其固定于某一檔,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。
 ?。?)調(diào)節(jié)“0”點(diǎn):
  輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器,使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處(此時(shí),比色皿暗箱蓋是打開(kāi)的,光路被切斷,光電管不受光照)。
 ?。?)調(diào)節(jié)T=100%:
  將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的第一格內(nèi),有色溶液放在其它格內(nèi),把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上,轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器,使透光度T=100%,即,表頭指針恰好指在T=100%處。
 ?。?)測(cè)定:
  輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿,使有色溶液進(jìn)入光路,此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華,讀數(shù)后,打開(kāi)比色皿暗箱蓋。
 ?。?)關(guān)機(jī):
  實(shí)驗(yàn)完畢,切斷電源,將比色皿取出洗凈,并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。